O sistema endocanabinóide já demonstrou desempenhar um papel na permeabilidade e na resposta inflamatória do intestino humano. O objetivo do nosso estudo foi determinar os efeitos da anandamida endógena (AEA) e do 2-araquidonoil glicerol (2-AG) na permeabilidade e na resposta inflamatória do epitélio intestinal em condições normais, inflamatórias e hipóxicas. A mucosa intestinal humana foi modelada usando células Caco-2. Tecido humano foi coletado de ressecções colorretais planejadas. O acúmulo de AEA e 2-AG foi obtido pela inibição de suas enzimas metabolizadoras URB597 (um inibidor de amida hidrolase de ácido graxo) e JZL184 (um inibidor de monoacilglicerol lipase). Inflamação e isquemia foram simuladas com TNF-α e IFN-γ e privação de oxigênio. As mudanças de permeabilidade foram medidas pela resistência elétrica transepitelial. O papel do receptor CB1 foi explorado usando células epiteliais intestinais CB1-knockdown (CB1Kd). Os níveis de endocanabinóides foram medidos por cromatografia líquida-espectrometria de massa. A secreção de citocinas foi medida usando multiplex e ELISA. URB597 e JZL184 causaram um aumento dependente da concentração na permeabilidade via CB1 (P <0,0001) e diminuição da produção de citocinas. A aplicação basolateral de JZL184 diminuiu a permeabilidade via CB1 (P <0,0001). URB597 e JZL184 aumentaram a permeabilidade aumentada (piorada) causada por inflamação e hipóxia (P < 0,0001 e P < 0,05). As células CB1Kd mostraram resposta de permeabilidade reduzida à inflamação (P <0,01), mas não hipóxia. Os níveis de 2-AG foram aumentados em resposta à inflamação e hipóxia nas células Caco-2. No tecido da mucosa humana, a inflamação aumentou a secreção do fator estimulador de colônias de granulócitos macrófagos, IL-12, -13 e -15, que foi prevenida com tratamento ex vivo com URB597 e JZL184, e foi inibida por um antagonista CB1. Os resultados deste estudo mostram que a produção endógena de AEA e 2-AG e a ativação de CB1 desempenham um papel modulador chave na permeabilidade normal da mucosa intestinal e em condições inflamatórias e hipóxicas.
